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隨著基礎醫學、醫療科技的不斷發展,血液分析儀的檢測原理也日益精準化、多樣化,檢測技術不斷創新,檢測參數顯著增多?!熬雀?、速度快、易操作、功能強”是現代血液分析儀的強勁優勢??v觀市面上不同廠商的血液分析儀,采用“核酸熒光染色”檢測原理的血液分析儀是眾多血球品牌中的主流與典范。
案例:患者,女性,28歲。因咽旁間隙感染到某基層醫院就診(使用三分群血液分析儀)。
血常規檢測結果如下(圖一):
血常規檢測結果顯示,WBC,12.8*109/L結果偏高,提示可能存在感染或炎癥;RBC、HGB結果輕度偏低,提示可能存在輕度貧血。臨床醫生基于此次血常規檢測結果,診斷為普通的細菌性感染,囑患者口服抗生素阿莫西林5天。一周后,患者癥狀仍沒有好轉,遂再次去另一家某醫院就診(使用某五分類核酸染色檢測原理的血液分析儀)檢測結果如下:
最終,該患者確認為:急性早幼粒白血?。∕3)。
該病例的思考:
該病例為典型的白血病漏檢病例,患者首次在三分群儀器上檢測,未發現幼稚細胞,第二次在五分類儀器上檢測,通過儀器的異常報警提示以及散點圖形態異常的提示,并結合鏡檢結果,最終診斷為白血病。避免了白血病的早期漏檢,為患者早期診斷、早期治療贏得了寶貴的時間和機會,同時,也規避了檢驗科自身的質量風險。
為何在三分群儀器上檢測會存在漏檢的風險,而在五分類血球儀上可規避異常細胞的漏檢,采用核酸熒光染色原理血液分析儀的技術優勢是什么?
三分群血液分析儀的檢測原理為電阻抗法,是根據細胞電阻性對細胞進行計數,利用細胞的體積大小不同引起電阻信號大小差異,來對白細胞進行分群和區分紅細胞和血小板,其獲取細胞的檢測信號單一,存在以下方面的檢測局限:
方法學單一,非特異性檢測
?。?)僅分大小,不辨其他特性,相同大小的顆粒易誤計數。
?。?)中間細胞包含了多種細胞,和成熟WBC分類有很大差異。
干擾大,準確性差
?。?)RBC對PLT的干擾
?。?)RBC對WBC的干擾
?。?)PLT對RBC的干擾
?。?)PLT對WBC的干擾
?。?)WBC對RBC的干擾
?。?)WBC對HGB的干擾
?。?)異常顆?;蛐盘柕母蓴_
報警提示的信息少,難以分辨處理
?。?)MID增多:可能是MONO、EOS、BASO、VAR-LYM、BLAST增多
?。?)LYM干擾:PLT、NRBC、FWBC、NWBC
?。?)PLT干擾:RBC、PLT本身、WBC、FWBC……
因此,三分群血液分析儀的檢測結果可信度不高,當全部推片復檢時,其工作量太大無法執行。
采用核酸熒光染色的五分類血液分析儀檢測原理及優勢:
檢測原理:
五分類血液分析儀采用特異性的核酸熒光染料,細胞經過特殊溶血素的處理后,熒光染料可以快速進入胞漿和胞核對核酸染色,細胞內的熒光染料在特定波長的激光激發下產生一定的熒光強度,這種熒光強度與細胞的核酸含量成正相關。
熒光染色后,熒光強度大小依次排列順序為:異型淋巴細胞 > 原始細胞/幼稚粒細胞 > 單核細胞 > 淋巴細胞 > 粒細胞/晚幼紅細胞 > 網織紅細胞/網織血小板/聚集血小板 > 成熟紅細胞/成熟血小板。
待測血樣稀釋成單個細胞懸液,細胞經過快速特異性核酸熒光染色,在鞘液的約束下,排成單列由流動室的噴嘴噴出,通過測量區的細胞在垂直入射的激光束照射和激發下,產生前向散射光(FSC)、側向散射光(SSC)、側向熒光(SFL)。FSC主要反映細胞的大??;SSC主要反映細胞內顆粒物質的大小和多少;SFL主要反映細胞的核酸含量的多少。
檢測優勢:
?。?)細胞識別和分類計數的準確率高:采用特異性的核酸熒光染色,對細胞大小、核酸多少、細胞內部復雜結構是作本質的鑒別,能準確區分不同種類、不同形態的細胞。如下圖,細胞經核酸熒光染色后,呈現了不同的形態特點和檢測信號,儀器便可準確區分。
?。?)異常細胞檢出靈敏度高
血液分析儀的應用價值之在于發現細胞數量異常和異常細胞(如幼稚粒細胞、異型淋巴細胞、原始細胞等),采用核酸熒光染色技術的五分類儀器,根據異常細胞的核酸含量較高,可以準確定量檢測異常的細胞,避免臨床上的漏檢,為早期發現惡性疾病和療效判斷提供了重要的臨床信息。
?。?)提供更多、更重要參數和報警信息
只有更多的檢測參數、更準確的報警信息,才能更好地指導檢驗醫生對異常樣本進行有針對性的復檢,從而保證異常樣本不被漏檢,做到規避檢驗結果錯誤、臨床醫生漏診、誤診的風險。
核酸熒光染色技術除應用于白細胞系參數的檢測外,還應用于紅細胞系參數、血小板系參數的檢測,如:網織紅細胞參數,RET-O、RBC-O、RET-He、LFR、MFR、HFR…等;血小板系參數:PLT-F、IPF…等。其檢測結果的精準度也被廣大的臨床用戶所認可。因此,采用核酸熒光染色原理的血液分析儀,必定是血液分析儀行業內的主流與典范。